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唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(椰毒假單胞菌酵米面亞種)檢驗解決方案

發(fā)布時間:2020-09-10      瀏覽次數(shù):12803    分享:

       今年8月,廣東省一家腸粉店發(fā)生食物中毒,11名顧客吃了店內(nèi)河粉后,出現(xiàn)嘔吐、腹瀉等癥狀,送醫(yī)后1人搶救無效去世,2人病情較重,其余人員暫無生命危險。

       經(jīng)調(diào)查,這起食物中毒的罪魁禍首是“椰毒假單胞菌”,中毒原因是因為某些菌株可以產(chǎn)生一種叫“米酵菌酸”的毒素,一旦吃了含有這種毒素的食物,就會表現(xiàn)為惡心、嘔吐、腹瀉、頭暈、全身無力,嚴重時會出現(xiàn)黃疸、肝腫大、皮下出血、嘔血、驚厥抽搐等癥狀,最嚴重的會出現(xiàn)休克甚至死亡。

       “椰毒假單胞菌”,全稱椰毒假單胞酵米面亞種Pseudomonas cocovenenans subsp. Farinofermentans,是一種存在于酵米面、變質(zhì)鮮銀耳及其他淀粉類發(fā)酵產(chǎn)品中的食源性致病菌,

       由于椰毒假單胞酵母菌酵米面亞種不是國際公開發(fā)表和承認的細菌分類科學(xué)名稱,1999年劃分為唐菖蒲伯克霍爾德氏菌Burkholderia gladioli的一個病原型,目前現(xiàn)行標準GB/T 4789.29-2003《食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗 椰毒假單胞菌酵米面亞種檢驗》。2018年9月國家衛(wèi)生健康委員會發(fā)布的《食品安全國家標準 食品微生物學(xué)檢驗 唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(椰毒假單胞菌酵米面亞種)檢驗(征求意見稿)》中,將該菌進行更名,同時新增分離培養(yǎng)基mPDA同PCFA用于唐菖蒲伯克霍爾德氏菌(椰毒假單胞菌酵米面亞種)的分離。

具體檢驗流程如下:

1. 檢驗流程(前增菌以及選擇性分離過程)



2. 檢驗流程初篩實驗

      自選擇性瓊脂平板上分別挑取5個以上典型或可疑菌落,分區(qū)劃線卵黃瓊脂平板,36℃±1℃培養(yǎng)。挑取培養(yǎng)18~24 h的菌落進行革蘭氏染色及氧化酶試驗。對于革蘭氏染色陰性、氧化酶試驗陰性的菌繼續(xù)培養(yǎng)至48 h±2 h,對于卵磷脂酶陽性,帶有虹彩環(huán)的單個菌落,接種PDA平板,36℃±1℃培養(yǎng)24 h±2 h。


(環(huán)凱貨號027162)卵黃瓊脂(卵磷脂酶試驗)

唐菖蒲伯克霍爾德氏菌恒溫?zé)晒鈹U增試劑盒快速檢測法

1. 技術(shù)原理:利用兩對特殊引物和具有鏈置換活性的BstDNA聚合酶,使模板兩端引物結(jié)合處循環(huán)出現(xiàn)環(huán)狀單鏈結(jié)構(gòu),引物順利與模板結(jié)合并進行鏈置換擴增反應(yīng),實現(xiàn)在恒溫條件下(60~65℃)進行連續(xù)快速擴增。反應(yīng)加入顯色指示劑,陰陽性結(jié)果顯色差異顯著,可直接通過顏色變化判讀結(jié)果。

2. 產(chǎn)品優(yōu)勢

操作簡便:簡單加樣操作,快速上手;

快速省時:獲得菌液后1 h完成檢測

靈敏度高:最低檢測限8CFU。

特異性強:利用靶基因序列上的多個獨立區(qū)域設(shè)計多條引物,保證擴增反應(yīng)的高度特異性

結(jié)果簡單可視:肉眼觀察顏色,可判斷結(jié)果。

“+”代表陽性;“-”代表陰性

3. 產(chǎn)品組分:

組分名稱

規(guī)格×數(shù)量

唐菖蒲伯克霍爾德氏菌檢測試劑(凍干)

3排× 8管

復(fù)溶液

650 μL × 1管

陽性對照(凍干)

1管

陰性對照(凍干)

1管

裂解液

1 mL × 1管

顯色指示劑

80 μL×1管

超純水

1 mL×1管

說明書

1份

4. 過程圖解:

5. 產(chǎn)品結(jié)果

“+”代表陽性;“-”代表陰性

相關(guān)產(chǎn)品信息

用途

產(chǎn)品編號

產(chǎn)品名稱

包裝規(guī)格

快速檢驗和鑒定

KJD16L

唐菖蒲伯克霍爾德氏菌核酸快速檢測試劑盒

核酸快速檢測試劑盒

24測試/盒

選擇性增菌

021055

GVC增菌液

250g/瓶

分離培養(yǎng)

021054

改良馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(mPDA)

250g/瓶

021059

PCFA培養(yǎng)基基礎(chǔ)

250g/瓶

SR0690

PCFA培養(yǎng)基配套試劑

10支/盒

卵磷脂酶試驗

027161

卵黃瓊脂基礎(chǔ)(適應(yīng)GB4789.29-2003)

250g/瓶

卵磷脂酶試驗

027162

卵黃瓊脂基礎(chǔ)(適應(yīng)GB4789.29修訂意見稿)

250g/瓶

純培養(yǎng)

021057

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基

250g/瓶

形態(tài)觀察

029010

革蘭氏染色液

4種×10mL/盒

氧化酶試驗

029172

氧化酶試劑

50測試/盒

動力試驗和產(chǎn)毒素試驗

021056

馬鈴薯葡萄糖半固體瓊脂

250g/瓶


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