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大腸桿菌檢測培養(yǎng)基滅菌后小倒管內留有氣泡原因及解決辦法

發(fā)布時間：2014-06-27      瀏覽次數(shù)：10664    分享：

  大腸菌群、大腸桿菌檢測時，所用培養(yǎng)基LST、BGLB、EC肉湯等這些需要用小倒管考察產氣的培養(yǎng)基，滅菌后，偶爾會有小氣泡留在小倒管內，導致培養(yǎng)基不能使用。重復滅菌不僅費時，更重要的是會破壞培養(yǎng)基的有效成分。為了避免這類問題的發(fā)生，我們做出如下分析：

原因一：高溫高壓滅菌鍋工作壓力不夠，使氣體不能完全排出

  高壓鍋在滅菌過程中產生的最大壓力不夠，不能將小倒管內的氣體擠出，導致滅菌后任留有小氣泡。此外，高溫高壓滅菌鍋若是溫度上升緩慢或者達不到滅菌溫度，也會出現(xiàn)類似現(xiàn)象。

  解決辦法：使用檢查滅菌效果的用品-壓力蒸汽滅菌指示卡，對高溫高壓滅菌鍋的滅菌情況進行監(jiān)測。

原因二：試管塞塞得太緊

  在滅菌時，試管塞塞得太緊(有些硅膠塞與試管不配套)會導致試管內壓力與滅菌鍋內壓力不一致。當滅菌鍋升溫升壓時，鍋內壓力會大于試管內壓力，試管內壓力不夠，不能將小倒管內氣體排盡，就留有氣泡;當滅菌鍋降溫降壓時，鍋內壓力小于管內壓力，可能會使試管塞和培養(yǎng)基崩出，培養(yǎng)基報廢。

  解決辦法：改用塑料帽、不銹鋼管帽，或者與試管相匹配的硅膠塞。

原因三：小倒管口太小

  小倒管在加熱加壓后，一方面液體培養(yǎng)基要進入小倒管，另一方面小倒管內部的空氣要被排出，如果小倒管管口太小，液體不容易進去，里面的空氣不容易被排出，就會導致有小氣泡生成。

  解決辦法：改用開口比較大的倒管。

以上提供幾種可能形成氣泡的主要原因，還有幾點建議：

  1.可以在高壓鍋壓力降下來后，溫度不太高的時候將培養(yǎng)基從鍋中拿出，迅速放在冷水中，急冷，注意要使冷水高度超過試管中液面高度。利用熱脹冷縮的原理，可以使小倒管中氣泡排出。

  2.若使用非全自動高溫高壓滅菌鍋(此類鍋一般需要在100℃手動關閉放氣閥)，則不要在鍋剛達到100℃時就關閉放氣閥，可以讓高壓鍋在100℃時多排一會兒熱氣，這樣有助于小倒管中氣體排出。

  此外，盡量不要采用將滅菌后的試管顛倒或大角度傾斜的方式，使小倒管內氣體排出。此種方法可能會導致培養(yǎng)基通過試管口或試管塞受到污染，或者導致試管內液體流出。

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