微生物廣泛存在于周圍環(huán)境中，其中有些又是病原微生物，從預(yù)防感染出發(fā)，醫(yī)務(wù)工作者必須嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作，對(duì)所用的物品和工作環(huán)境進(jìn)行消毒滅菌，確保醫(yī)療與科研正常進(jìn)行。消毒滅菌主要是通過理化因素使微生物的主要代謝發(fā)生障礙，或菌體蛋白質(zhì)變性凝固，或破壞其遺傳物質(zhì)，導(dǎo)致微生物死亡。這里主要介紹物理因素殺滅微生物的幾種方法，以及相關(guān)器材的使用。

  (一)高壓蒸汽滅菌器

  蒸汽滅菌器構(gòu)造

  高壓蒸汽滅菌器是一個(gè)雙層的金屬圓筒，兩層之間盛水，外層堅(jiān)固厚實(shí)，其上方有金屬厚蓋，蓋旁附有螺旋，借以緊閉蓋門，使蒸汽不能外溢，因而蒸汽壓力升高，隨著其溫度亦相應(yīng)地增高。

  高壓蒸汽滅菌器上裝有排氣閥門、安全活塞，以調(diào)節(jié)蒸汽壓力。有溫度計(jì)及壓力表，以表示內(nèi)部的溫度和壓力。滅菌器內(nèi)裝有帶孔的金屬擱板，用以放置要滅菌物體。

  蒸汽滅菌器用法方法

  加水至外筒內(nèi)，被滅菌物品放入內(nèi)筒。蓋上滅菌器蓋，擰緊螺旋使之密閉。滅菌器下用煤氣或電爐等加熱，同時(shí)打開排氣閥門，排凈其中冷空氣，否則壓力表上所示壓力并非全部是蒸汽壓力，滅菌將不完全。

  待冷空氣全部排出后(即水蒸氣從排氣閥中連續(xù)排出時(shí))，關(guān)閉排氣閥。繼續(xù)加熱，待壓力表漸漸升至所需壓力時(shí)(一般是101.53 kPa，即15磅/英寸2，溫度為121.3℃)，調(diào)解爐火，保持壓力和溫度(注意壓力不要過大，以免發(fā)生意外)，維持15~30 min。滅菌時(shí)間到達(dá)后，停止加熱，待壓力降至零時(shí)，慢慢打開排氣閥，排除余氣，開蓋取物。切不可在壓力尚未降低為零時(shí)突然打開排氣閥門，以免滅菌器中液體噴出。

  高壓蒸汽滅菌法為濕熱滅菌法，其優(yōu)點(diǎn)有三：一濕熱滅菌時(shí)菌體蛋白容易變性，二濕熱穿透力強(qiáng)，三蒸氣變成水時(shí)可放出大量熱增強(qiáng)殺菌效果，因此，它是效果最好的滅菌方法。凡耐高溫和潮濕的物品，如培養(yǎng)基、生理鹽水、衣服、紗布、棉花、敷料、玻璃器材、傳染性污物等都可應(yīng)用本法滅菌。

  目前出現(xiàn)的便攜式全自動(dòng)電熱高壓蒸汽滅菌器，操作簡單，使用安全。

  (二)干熱滅菌器(烤箱)

  干熱滅菌器構(gòu)造

  干熱滅菌器是由雙層鐵板制成的方形金屬箱，外壁內(nèi)層裝有隔熱的石棉板。箱底下放置大型火爐，或在箱壁中裝置電熱線圈。內(nèi)壁上有數(shù)個(gè)孔，供流通空氣用。箱前有鐵門及玻璃門，箱內(nèi)有金屬箱板架數(shù)層。電熱烤箱的前下方裝有溫度調(diào)節(jié)器，可以保持所需的溫度。

  干熱滅菌器用法方法

  將培養(yǎng)皿、吸管、試管等玻璃器材包裝后放入箱內(nèi)，閉門加熱。當(dāng)溫度上升至160～170℃時(shí)，保持溫度2 h，到達(dá)時(shí)間后，停止加熱，待溫度自然下降至40℃以下，方可開門取物，否則冷空氣突然進(jìn)入，易引起玻璃炸裂;且熱空氣外溢，往往會(huì)灼傷取物者的皮膚。一般吸管、試管、培養(yǎng)皿、凡士林、液體石蠟等均可用本法滅菌。

  (三)電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱

  恒溫干燥箱特點(diǎn)

  1.工作室采用優(yōu)質(zhì)鋼板或不銹鋼板。

  2.微電腦智慧控溫儀，具有設(shè)定，測定溫度雙數(shù)字顯、帶數(shù)字定時(shí) 器，定時(shí)范圍 ：0~9999 min 。 帶加熱功率調(diào)節(jié)功能，垂直強(qiáng)迫對(duì)流、功率抑制和自整定功能 , 確保干燥箱運(yùn)行過程的溫度精度和穩(wěn)定性.

  3.采用高精度傳感器，誤差小，溫度控制準(zhǔn)確性高。

  4.鼓風(fēng)電機(jī)德國原裝進(jìn)口，耐高溫耐高濕，噪音低，擺動(dòng)幅度小，有利于保證干燥箱內(nèi)溫度均一。

  恒溫干燥箱優(yōu)勢

  1.全不銹鋼內(nèi)腔，無需任何工具即可方便拆卸內(nèi)擱板，便于清洗。

  2.內(nèi)膽內(nèi)圓角，減少了不必要的內(nèi)表面面積，從而減少了細(xì)菌污染機(jī)率，更于快速有效地清潔內(nèi)壁。

  3.熱風(fēng)循環(huán)系統(tǒng)由低噪聲風(fēng)機(jī)和風(fēng)道組成，工作室內(nèi)溫度均勻。

  4.配備鋼化玻璃窗，便于觀察樣品。

  (四)除菌濾器

  除菌濾器簡稱濾菌器。種類很多，孔徑非常小，能阻擋細(xì)菌通過。它們可用陶瓷、硅藻土、石棉或玻璃屑等制成。下面介紹幾種常用的濾菌器。

  濾菌器構(gòu)造

  ①賽氏濾菌器：由三部分組成。上部的金屬圓筒，用以盛裝將要濾過的液體;下部的金屬托盤及漏斗，用以接受濾出的液體;上下兩部分中間放石棉濾板，濾板按孔徑大小可分為三種：K濾孔最大，供澄清液體之用;EK濾孔較小，供濾過除菌;EK-S濾孔更小，可阻止一部分較大的病毒通過。濾板依靠側(cè)面附帶的緊固螺旋擰緊固定。

  ②玻璃濾菌器：由玻璃制成。濾板采用細(xì)玻璃砂在一定高溫下加壓制成?？讖接?.15～250 μm不等，分為G1、G2、G3、G4、G5、G6六種規(guī)格，后兩種規(guī)格均能阻擋細(xì)菌通過。

  ③薄膜濾菌器：由塑料制成。濾菌器薄膜采用優(yōu)質(zhì)纖維濾紙，用一定工藝加壓制成?？讖剑?00 nm，能阻擋細(xì)菌通過。

  濾菌器用法

  將清潔的濾菌器(賽氏濾菌器和薄膜濾菌器須先將石棉板或?yàn)V菌薄膜放好，擰牢螺旋)和濾瓶分別用紙或布包裝好，用高壓蒸汽滅菌器滅菌。再以無菌操作把濾菌器與濾瓶裝好，并使濾瓶的側(cè)管與緩沖瓶相連，再使緩沖瓶與抽氣機(jī)相連。將待濾液體倒入濾菌器內(nèi)，開動(dòng)抽氣機(jī)使濾瓶中壓力減低，濾液則徐徐流入濾瓶中。濾畢，迅速按無菌操作將濾瓶中的濾液放到無菌容器內(nèi)保存。濾器經(jīng)高壓滅菌后，洗凈備用。

  濾菌器用途

  用于除去混雜在不耐熱液體(如血清、腹水、糖溶液、某些藥物等)中的細(xì)菌。

  (五)紫外線燈的使用

  紫外線中波長為240～280 nm者具有殺菌能力，其中265～266 nm的殺菌作用最強(qiáng)。醫(yī)學(xué)上常使用紫外線燈產(chǎn)生紫外線進(jìn)行消毒滅菌。常用的是水銀燈，燈管由石英玻璃制成，管內(nèi)充滿壓強(qiáng)為266 Pa的氬和幾滴水銀。其殺菌作用主要是因?yàn)镈NA吸收了紫外線引起胸腺嘧啶形成二聚體，從而干擾了DNA的復(fù)制，輕則發(fā)生突變，重則導(dǎo)致死亡。紫外線殺菌力強(qiáng)而穩(wěn)定，但穿透力弱，不能透過普通玻璃和有色紙張，因此，只適用于直接照射的物體表面消毒或空氣消毒。

  紫外線滅菌使用方法

  將涂有細(xì)菌的平皿放置在距紫外線60～100 cm處，直接受紫外線照射30 min后，37℃孵育24h后觀察生長情況。

  (六)紅外線接種環(huán)滅菌器

  紅外線接種環(huán)滅菌器用途

  接種環(huán)、接種針、小鑷子、小剪刀等最新高溫滅菌設(shè)備。其沒有明火，不產(chǎn)生亂流，是生物安全柜的必備小型滅菌設(shè)備。

  紅外線接種環(huán)滅菌器原理

  需消毒的物品通過置入溫度高達(dá)900℃的高效陶瓷紅外線加熱管中，經(jīng)過5～7秒的高溫灼燒，從而達(dá)到滅菌效果。

  紅外線接種環(huán)滅菌器特點(diǎn)

  1.采用微電腦智能控溫儀，具備自整定PID技術(shù)，控溫準(zhǔn)確，響應(yīng)速度快，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)定滅菌溫度;由于采用控溫功能，當(dāng)溫度達(dá)到設(shè)定溫度時(shí)會(huì)自動(dòng)停止對(duì)加熱管工作，這種間斷式的加熱方式，不會(huì)使加熱管全程全功率工作，可以讓它的使用壽命延長一倍;有溫度表顯示當(dāng)前溫度值，可以更直觀地把握滅菌溫度，而不用擔(dān)心滅菌不充分的情況。

  2.體積小，重量輕，操作簡便;安全方便，無明火操作，加熱組件采用高效陶瓷紅外線加熱管，升溫快，溫度高，使用壽命長。

  3.可快速消毒小型器械，不受外界因素的影響，可提高實(shí)驗(yàn)的工作效率，能適應(yīng)各種實(shí)驗(yàn)環(huán)境。

  4.主體采用304不銹鋼制造，耐腐蝕、美觀、易于清潔。