大家都知道,培養(yǎng)基是供微生物生長、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。由于微生物具有不同的營養(yǎng)類型,對營養(yǎng)物質(zhì)的要求也各不相同,加之實(shí)驗(yàn)和研究的目的不同,所以培養(yǎng)基的種類很多,使用的原料也各有差異。為了達(dá)到實(shí)驗(yàn)和研究的目的,要按照培養(yǎng)基的配方進(jìn)行配制。而任何一種培養(yǎng)基一經(jīng)制成就應(yīng)及時徹底滅菌,以備純培養(yǎng)用。一般培養(yǎng)基的滅菌采用高壓蒸汽滅菌。那么培養(yǎng)基配好后為什么必須立即滅菌?
發(fā)酵過程中,培養(yǎng)基滅菌主要有以下幾個原因:如不滅菌,會使生物反應(yīng)的基質(zhì)或產(chǎn)物,因雜菌的消耗而損失,造成生產(chǎn)能力的下降;雜菌也會產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,這就使產(chǎn)物的提取更加困難,造成得率降低,產(chǎn)品質(zhì)量下降;雜菌大量繁殖后,會改變反應(yīng)液的pH值,使反應(yīng)異常;有些雜菌會分解產(chǎn)物,使生產(chǎn)失敗;如果發(fā)生噬菌體污染,生產(chǎn)菌細(xì)胞將被裂解,使生產(chǎn)失敗。
培養(yǎng)基滅菌是殺滅培養(yǎng)基中本身的原著菌或在空氣中附著的雜菌,更好的讓目標(biāo)菌生長(減少雜菌消耗培養(yǎng)基中的營養(yǎng),而且有些雜菌會抑制你目標(biāo)菌的生長)。
一般人工培養(yǎng)菌基本上是盡可能讓其生長快速或者產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,因此就讓其在最適培養(yǎng)基上生長,以減少培養(yǎng)時間與提高經(jīng)濟(jì)效益。
培養(yǎng)基的滅菌效果檢查方法
將培養(yǎng)基放在將要做實(shí)驗(yàn)的溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)(時間與培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)一致,一般是24小時)看滅菌后培養(yǎng)基的菌落就可以判斷。有時也為了使用培養(yǎng)更加科學(xué),在做細(xì)菌培養(yǎng)時,除在在涂上需要培養(yǎng)的菌種外,同時另外加一個培養(yǎng)基(空白)同時進(jìn)行同條件培養(yǎng)進(jìn)行對比。
培養(yǎng)基配置好后如果存放時間較長而不進(jìn)行滅菌操作,那么培養(yǎng)基內(nèi)的微生物就會在其中發(fā)酵生長從而破壞培養(yǎng)基內(nèi)的營養(yǎng)成分,并且這些微生物的生長過程中會分泌一些毒素從而會抑制目標(biāo)培養(yǎng)菌的生長。
另外,可以滅菌結(jié)束后將培養(yǎng)基放置在培養(yǎng)箱內(nèi)2~3天,如觀察培養(yǎng)基無任何變化(無菌落生長)即說明已達(dá)到無菌狀態(tài)。