產(chǎn)品名稱:NGS DNA Library FlashPrep Kit for Illumina
中文名稱:Illumina NGS Flash 建庫試劑盒
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:
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HKN231-N234系列 | NGS DNA Library FlashPrep Kit for Illumina | 24次 | 96次 | NGS 文庫制備試劑盒(用于 Illumina 系統(tǒng)) | — |
HKN231-N234A | NGS DNA Library FlashPrep Kit for Illumina | 24次 | 6840 | |
HKN231-N234B | Illumina NGS Flash 建庫試劑盒 | 96次 | 25970 |
產(chǎn)品描述:環(huán)凱生物 NGS DNA Library FlashPrep Kit for Illumina 是針對 Illumina 高通量測序平臺開發(fā)的專用試劑盒,可將 DNA 制備 成 Illumina 高通量測序平臺專用的測序文庫。該試劑盒采用新型的體外轉(zhuǎn)座技術(shù),只需 5 分鐘即可一步實(shí)現(xiàn) DNA 的片段化與接 頭連接,實(shí)驗(yàn)操作快速簡單,無需經(jīng)過傳統(tǒng)文庫制備時的片段化、末端修復(fù)、接頭連接等繁瑣步驟,并經(jīng)工藝優(yōu)化,PCR 擴(kuò)增 前無需磁珠純化,更加省時省力。使用本試劑盒建庫時,起始 DNA 量更靈活,有 50ng、20ng、5ng、1ng 四種規(guī)格可選(目錄 號分別為:HKN231,HKN232,HKN233,HKN234)。
適用范圍:適用于將 DNA 制備成 Illumina 高通量測序平臺專用文庫。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1、快速簡單,流暢高效,90 分鐘完成文庫制備;
2、DNA 起始量 1ng 起,可用于微量樣本測序,包含四種起始規(guī)格,有效避免 DNA 起始量不足的情況。
文庫結(jié)構(gòu):5’-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC-Index2(i5)-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-xxxxxxx xx-CTGTCTCTTATACACATCTCCGAGCCCACGAGAC-Index1(i7)-ATCTCGTATGCCGTCTTCTG CTTG-3’
Adapter1 和 Adapter2 :轉(zhuǎn)座復(fù)合物中包被的兩種接頭,分別帶有 N5/N7 引物識別序列及轉(zhuǎn)座酶識別序列,文庫打斷的同時 會添加到 DNA 片段兩端。
i5 和 i7 :分別代表 Index2(i5)和 Index1(i7),均為 8bp。
N5 和 N7 :分別攜帶 Index2(i5)和 Index1(i7)的引物。
-xxxxxxxxx- : 插入序列。
保存條件:所有組分-20℃保存,有效期一年。
NGS DNA Library FlashPrep Kit for Illumina 產(chǎn)品組成:
Component | 24 rxns | 96 rxns |
Transposon Mix | 48μL | 1921μL |
5×Reaction Buffer | 120μL | 480μL |
5×Stop Buffer | 135μL | 540μL |
AmpliMix | 600μL | 2400μL |
質(zhì)量控制:試劑盒中提供的所有試劑都經(jīng)過嚴(yán)格的質(zhì)量控 制和功能驗(yàn)證,最大程度上保證文庫質(zhì)量的穩(wěn)定性和重復(fù)性。
操作流程:適用于將 DNA 制備成 Illumina 高通量測序平臺專用文庫。
1, 實(shí)驗(yàn)耗材準(zhǔn)備 新鮮配制的 80%乙醇、滅菌超純水、低吸附 EP 管和 PCR 管、磁力架、PCR 儀、磁珠。
2, 起始 DNA 的準(zhǔn)備與要求 純化過的 DNA 溶于滅菌純水或 10mMTris-HCl (pH8.0),吸光度 260/280 在 1.8~2.0 之間。因?yàn)檗D(zhuǎn)座體用量與 DNA 起始量密 切相關(guān),所以準(zhǔn)確測定 DNA 濃度是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。推薦使用 Qubit 或熒光染料 PicoGreen 進(jìn)行濃度測定,請勿使用以吸光度 為基礎(chǔ)的任何測定方法。
3, 實(shí)驗(yàn)流程: