微生物檢測凍干質控菌種蠟樣芽孢桿菌 CMCC(B)63301使用說明
1、 復蘇蠟樣芽孢桿菌質控菌種前應準備適于該菌種生長的培養(yǎng)基和培養(yǎng)設備,所有操作均應在符合生物安全保護及無菌條件下進行。
2、 啟開蠟樣芽孢桿菌質控菌種前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開塑蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞,加入復蘇液(購買菌株包裝中提供),將蠟樣芽孢桿菌凍干菌種(干粉)制成懸浮液,然后用無菌滴管或移液器吸取適量,移至非選擇性固體培養(yǎng)基平板(或液體培養(yǎng)基)上(除特殊情況或特別推薦外),按推薦的培養(yǎng)條件進行培養(yǎng)和傳代保存(詳見附表“凍干菌種的復蘇培養(yǎng)和傳代保存”)。
3、 有個別凍干菌種(如弧菌屬、乳桿菌屬等)復蘇速度較慢,可按2操作后,同時將菌懸液置推薦的培養(yǎng)條件培養(yǎng)過夜,再選用適合該菌種生長的選擇性培養(yǎng)基進行分離,操作見4。
4 、培養(yǎng)后觀察菌種的生長情況,并檢查其純度,如發(fā)現(xiàn)純度不能滿足要求時,應選用適合蠟樣芽孢桿菌生長的選擇性培養(yǎng)基進行分離,并按推薦的培養(yǎng)條件進行培養(yǎng),培養(yǎng)后觀察目標菌的菌落特征與生化特征,挑取典型菌落做純培養(yǎng)后再使用。
5、 凍干質控菌種為一次性用品,開啟之后不宜反復使用或保存,暫不使用時,建議4℃保藏。
6、 復蘇后的菌種一般宜傳代(如:斜面?zhèn)鞔?~3次后使用,菌種傳代5次后建議棄置。
7 、蠟樣芽孢桿菌質控菌種購買后應在保質期內使用。
注):購買后如發(fā)現(xiàn)菌種異?;蛭廴镜惹闆r,請在購買之日起1個月內與我們聯(lián)系。
凍干菌種蠟樣芽孢桿菌復蘇示意圖:
附表 凍干質控菌種的復蘇培養(yǎng)和傳代保存
質控菌種名稱 復蘇液 (包裝中提供) 復蘇培養(yǎng)基 培養(yǎng)條件 保存溫度 轉接 頻率 備注 大腸埃希氏菌、沙門氏菌、志賀氏菌 腦心浸液培養(yǎng)基 營養(yǎng)瓊脂(022020) 24h~48h 2~ 一個月 阪崎腸桿菌、陰溝腸桿菌、產氣腸桿菌 肺炎克雷伯氏菌、粘質沙雷伯氏菌 變形桿菌、弗氏檸檬酸桿菌 小腸結腸炎耶爾森氏菌 葡萄球菌、微球菌、馬紅球菌、芽胞桿菌 假單胞菌、氣單胞菌屬 腦心浸液培養(yǎng)基 營養(yǎng)瓊脂(022020) 24h~48h 一個月 熒光假單胞菌 腦心浸液培養(yǎng)基 營養(yǎng)瓊脂(022020) 25℃-30℃ 24h~48h 一個月 腸球菌、鏈球菌 腦心浸液培養(yǎng)基 血平板(024070) 24h~48h 2~ 半個月 李斯特氏菌 腦心浸液培養(yǎng)基 胰蛋白胨大豆酵母浸膏瓊脂 (TSA-YE) (026020) 24h~48h 2~ 一個月 梭菌 腦心浸液培養(yǎng)基 皰肉牛肉粒肉湯(027140)或梭菌増菌肉湯(027145)或哥倫比亞血平板(CP0160) 48h~72h厭氧培養(yǎng) 2~8℃ 厭氧環(huán)境 半個月 接種皰肉牛肉粒肉湯后加無菌液體石蠟(029110)高約1cm。 霍亂弧菌、擬態(tài)弧菌 堿性蛋白胨水 堿性瓊脂(025040) 24h~48h 一個月 其它弧菌(副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌、河流弧菌、溶藻弧菌等) 3%NaCl堿性蛋白胨水 3%NaCl 營養(yǎng)瓊脂 或3%NaCl TSA (025043) 24h~48h 一個月 霉菌、念珠菌、酵母菌 沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)(021050) 2d~5d 2~ 兩個月 空腸彎曲菌 布氏肉湯 血平板(024070) 42± 42± 2~ 微需氧 一周 雙歧桿菌 TPY肉湯 雙歧桿菌瓊脂(027330) 48h~72h厭氧培養(yǎng) 2~ 厭氧環(huán)境 一周 其它乳酸菌(乳酸桿菌、乳酸桿菌亞種、嗜熱乳酸鏈球菌) MRS肉湯或脫脂乳溶液 滅菌脫脂乳或 MRS瓊脂(027315) 24h~48h 2~ 一周 嗜血桿菌屬、奈瑟氏菌屬 腦心浸液培養(yǎng)基 巧克力平板培養(yǎng)基 (普通)(029032) 48h~72h 5~10%CO2環(huán)境 2~ 5~10%CO2 環(huán)境 一周 軍團菌 腦心浸液培養(yǎng)基 BCYE平板 (CP0020) 4d~7d 2~ 一個月 轉接時用一次性接種環(huán),不能使用酒精燈;如使用平板轉接,培養(yǎng)時建議用牛皮紙或報紙包好,避免平板失水變干。