微生物檢測凍干質(zhì)控菌種銅綠假單胞菌 ATCC9027使用說明書
1 復蘇菌種前應準備適于該菌種生長的固體、液體培養(yǎng)基和培養(yǎng)設備,所有操作均應在符合生物安全保護及無菌條件下進行。
2 啟開菌種銅綠假單胞菌 ATCC9027前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面。在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開塑蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞,加入0.3mL左右的配套液體培養(yǎng)基,用無菌滴管反復吹吸,將凍干菌種溶解成為懸液,然后用無菌滴管或接種環(huán)移至斜面、平板或液體培養(yǎng)基,并連同剩余菌懸液的西林瓶一起放置于36℃培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。(菌種與培養(yǎng)和保存方法對應表見附表1,培養(yǎng)基、培養(yǎng)方法和傳代保存方法見附表2)。
3 次日觀察菌種的生長情況,如未生長,應繼續(xù)培養(yǎng)24h,或吸取培養(yǎng)之后的菌懸液中再次接種培養(yǎng)基,培養(yǎng)24h觀察。
4 菌株為一次性使用品,開啟之后不能反復使用或保存,暫不開啟的菌種應在4℃保藏。
5 復蘇后的菌種在傳1-2代后使用,建議菌種使用5代后棄用。
注):購買后請盡量及時使用凍干菌種,如發(fā)現(xiàn)菌種不活或污染等情況,請在購買之日起1個月內(nèi)與我們聯(lián)系。
凍干菌種銅綠假單胞菌 ATCC9027復蘇示意圖:
附表 凍干質(zhì)控菌種的復蘇培養(yǎng)和傳代保存
名稱 復蘇液 (包裝中提供) 復蘇培養(yǎng)基 培養(yǎng)條件 保存溫度 轉(zhuǎn)接 頻率 備注 大腸埃希氏菌、沙門氏菌、志賀氏菌 腦心浸液培養(yǎng)基 營養(yǎng)瓊脂(022020) 24h~48h 2~ 一個月 阪崎腸桿菌、陰溝腸桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌 肺炎克雷伯氏菌、粘質(zhì)沙雷伯氏菌 變形桿菌、弗氏檸檬酸桿菌 小腸結腸炎耶爾森氏菌 葡萄球菌、微球菌、馬紅球菌、芽胞桿菌 假單胞菌、氣單胞菌屬 腦心浸液培養(yǎng)基 營養(yǎng)瓊脂(022020) 24h~48h 一個月 熒光假單胞菌 腦心浸液培養(yǎng)基 營養(yǎng)瓊脂(022020) 25℃-30℃ 24h~48h 一個月 腸球菌、鏈球菌 腦心浸液培養(yǎng)基 血平板(024070) 24h~48h 2~ 半個月 李斯特氏菌 腦心浸液培養(yǎng)基 胰蛋白胨大豆酵母浸膏瓊脂 (TSA-YE) (026020) 24h~48h 2~ 一個月 梭菌 腦心浸液培養(yǎng)基 皰肉牛肉粒肉湯(027140)或梭菌増菌肉湯(027145)或哥倫比亞血平板(CP0160) 48h~72h厭氧培養(yǎng) 2~8℃ 厭氧環(huán)境 半個月 接種皰肉牛肉粒肉湯后加無菌液體石蠟(029110)高約1cm。 霍亂弧菌、擬態(tài)弧菌 堿性蛋白胨水 堿性瓊脂(025040) 24h~48h 一個月 其它弧菌(副溶血性弧菌、創(chuàng)傷弧菌、河流弧菌、溶藻弧菌等) 3%NaCl堿性蛋白胨水 3%NaCl 營養(yǎng)瓊脂 或3%NaCl TSA (025043) 24h~48h 一個月 霉菌、念珠菌、酵母菌 沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 (PDA)(021050) 2d~5d 2~ 兩個月 空腸彎曲菌 布氏肉湯 血平板(024070) 42± 42± 2~ 微需氧 一周 雙歧桿菌 TPY肉湯 雙歧桿菌瓊脂(027330) 48h~72h厭氧培養(yǎng) 2~ 厭氧環(huán)境 一周 其它乳酸菌(乳酸桿菌、乳酸桿菌亞種、嗜熱乳酸鏈球菌) MRS肉湯或脫脂乳溶液 滅菌脫脂乳或 MRS瓊脂(027315) 24h~48h 2~ 一周 嗜血桿菌屬、奈瑟氏菌屬 腦心浸液培養(yǎng)基 巧克力平板培養(yǎng)基 (普通)(029032) 48h~72h 5~10%CO2環(huán)境 2~ 5~10%CO2 環(huán)境 一周 軍團菌 腦心浸液培養(yǎng)基 BCYE平板 (CP0020) 4d~7d 2~ 一個月 轉(zhuǎn)接時用一次性接種環(huán),不能使用酒精燈;如使用平板轉(zhuǎn)接,培養(yǎng)時建議用牛皮紙或報紙包好,避免平板失水變干。