食品中金黃色葡萄球菌（定量）檢測的能力驗證
發(fā)布時間：2023-03-17 瀏覽次數(shù)：882
一、能力驗證的目的
開展能力驗證試驗是檢驗實驗室檢測能力和提高檢測水平的重要手段。利用實驗室間的比對，對實驗室的校準(zhǔn)或檢驗工作進(jìn)行判定。目的是為了實現(xiàn)確定某個實驗室進(jìn)行某些特定檢測或測量能力，以及監(jiān)控實驗室的持續(xù)能力。
二、能力驗證步驟
1、前期做好充足的準(zhǔn)備工作，根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)，盡可能制定一個檢驗檢測的方案，以便保證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
2、樣品來源：2瓶不同的真空西林瓶裝白色凍干粉末樣品
3、樣品處理
樣品儲存：-15℃以下冷凍保存
樣品活化步驟（建議）：-20℃~ 4℃（30min），然后室溫（30min），接著樣品再水化（盡量減少大范圍溫度變化對待測樣品的影響）。
樣品再水化：一般能力驗證樣品以國體粉末形式發(fā)放，以液體（CFU/mL）形式出報告。樣品再水化前一定要認(rèn)真、仔細(xì)閱讀作業(yè)指導(dǎo)書，無特殊規(guī)定，本次水化后的樣品40mL為待測原液。
4、方法選擇國標(biāo)第二法
5、B-P平板計數(shù)（20 CFU ~200 CFU）
（1）1號樣品：37℃，培養(yǎng)48h
100稀釋（接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL）
1000倍稀釋（接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL）
（2）2號樣品：37℃，培養(yǎng)48h
10稀釋（接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL）
100稀釋（接種量0.3mL,0.3mL,0.4mL）
平板涂布不是很好，有少部分菌落跑到了平板邊緣處，對于計數(shù)會有些影響。大家在該操作過程中涂布棒盡量不要接觸平板邊緣。
注意事項：
a.B-P瓊脂平板制作：盡量在試驗前一天制作好，當(dāng)天制作平板得出的結(jié)果與之相差較大，原因可能是平板涂布時沒有完全干燥導(dǎo)致的。
b.梯度稀釋（25mL+225mL）：是關(guān)鍵步驟，必須盡可能地減少誤差（新手建議渦旋混勻，渦旋時間不宜過長，長時間離心力等作用下，微生物細(xì)胞可能死亡）。
c.涂布：盡可能涂布均勻，不要接觸平板邊緣，避免菌落疊在一起，而導(dǎo)致無法計數(shù)。
6、血平板（溶血觀察）
（1）1號樣品溶血情況（正反面）挑取平板5個菌落進(jìn)行試驗（只列出前三個菌落結(jié)果）
（2）2號樣品溶血情況（正反面，只列出前三個菌落結(jié)果）
7、血漿凝固酶試驗
（2）血漿凝固酶試驗（凍干兔血漿：廣東環(huán)凱）
1號樣品：
2號樣品：
8、鏡檢
（1）1號樣品
（2）2號樣品
9、 能力驗證結(jié)果
來源：“食品微生物檢測”公眾號 StreamCHC
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