產(chǎn)品名稱：NGS mRNA Magnetic Isolation Kit
產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格：
| 編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 價(jià)格 |
| HKE242A | NGS mRNA Magnetic Isolation Kit | 12次 | NGS mRNA 磁珠分離試劑盒 | 330 |
| HKE242B | 48次 | 1169 |
產(chǎn)品概述：NGS mRNA Magnetic Isolation Kit 是從總 RNA 中提取 mRNA 的試劑盒，該技術(shù)基于 Oligo-dT25 與鏈霉親和素磁珠偶聯(lián)，然后將其作為結(jié)合 poly(A)-mRNA 的固相支持物來(lái)分離 mRNA。該試劑盒可應(yīng)用于 RNA-Seq、 cDNA合成及體外翻譯等。
產(chǎn)品特點(diǎn)：
1、本試劑盒根據(jù)磁珠法提取 mRNA，操作簡(jiǎn)便，無(wú)需離心。
2、分離出的 mRNA 最后用少量洗脫緩沖液溶解，可直接進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)，無(wú)需再經(jīng) RNA 沉淀純化。
3、本試劑盒可適用于（10ng-5μg）RNA 樣本，mRNA 回收產(chǎn)率為總 RNA 含量的 1％-2％。
4、本試劑盒可在 30 分鐘內(nèi)從總 RNA 中獲得完整的 mRNA，省時(shí)高效。
保存條件：Oligo-dT25 Mag Beads 4℃保存，除磁珠外其他緩沖液均-20℃保存。
NGS mRNA Magnetic Isolation Kit 產(chǎn)品組成：
| A 包裝（12 次） | B 包裝（48 次） | |
| Oligo-dT25 Mag Beads | 200μl | 800μl |
| Binding Buffer(2×) | 3ml | 12ml |
| Wash Buffer | 8ml | 30ml |
| Elution Buffer | 300μl | 1.2ml |
| RNase Free Water | 1ml | 1ml×2 |
操作步驟：冰盒、0.2ml 磁力架、0.2ml/1.5ml Nuclease-free 管、65℃水浴鍋、PCR儀等實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備材料。
1、將 Oligo-dT25 Mag Beads 從 4℃取出，靜置使其溫度平衡至室溫（約 30 min）。
2、將磁珠充分混勻，吸取 15μl 到 Nuclease-free PCR 管中，置于磁力架中，室溫靜置 30s，小心移除上清。
3、加入 100μl 2×Binding Buffer 洗滌磁珠，輕輕混勻，置于磁力架中，室溫靜置 1min，小心移除上清。
4、重復(fù)步驟 3。
5、加入 50μl 2×Binding Buffer 重懸磁珠。
6、在一個(gè) Nuclease-free PCR 管中，用 RNase free water 將 0.1-5 μg 總 RNA 稀釋至 50 μl，65℃溫育 5min。
7、立即將步驟 5 中的懸浮液加入到步驟 6 的 RNA 中，輕輕混勻，室溫靜置 10min 以上，使其溫度降至室溫。（此步驟 mRNA 與磁珠結(jié)合）
8、將樣品置于磁力架中，室溫靜置 2 min，小心移除上清。
9、加入 200μl Wash Buffer，輕輕混勻，將樣品重新放回至磁力架中，室溫靜置 1min，小心移除上清。
10、重復(fù)步驟 9 兩次，最后吸除全部上清。
注：最后需要用 10μl 移液器吸干凈殘留液體。
11、加入 21μl Elution Buffer，混勻后將樣品放入 PCR 儀中，80℃，2min；待溫度降至 25℃后取出，立即置于磁力架中，室溫靜置 2min，收集 20μl 上清。（此步驟 mRNA 與磁珠分離）
注：樣品可置于冰上繼續(xù)進(jìn)行 NGS 文庫(kù)構(gòu)建或其他分析應(yīng)用，也可以置于-80℃保存。
注意事項(xiàng)：
1） 磁珠需置于 4℃保存。
2） 磁珠使用前務(wù)必要回溫至室溫，并充分混勻，否則可能影響樣品的回收效率。
3） 操作過(guò)程嚴(yán)格保證無(wú) RNase 和核酸污染。
4） 為獲得好的純化效果，提取的總 RNA 完整度應(yīng)良好，確保 RIN 值在 7.0 及以上。
