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HKE368 Cas9(D10A,H840A) Nuclease(核酸酶)

英文名稱:Cas9(D10A,H840A) Nuclease

貨 號(hào) :HKE368

規(guī) 格 :50μg/盒

用途:核酸酶

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產(chǎn)品名稱:Cas9(D10A,H840A) Nuclease
中文名稱:Cas9(D10A,H840A) 核酸酶

產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格:

編號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格產(chǎn)品介紹價(jià)格
HKE368Cas9(D10A,H840A) Nuclease50μg/盒crispr基因編輯(核酸酶)1575

產(chǎn)品描述:
      CRISPR/Cas9 是細(xì)菌和古細(xì)菌在長(zhǎng)期演化過程中形成的一種適應(yīng)性免疫防御系統(tǒng),改造后的 II 型 CRISPR/Cas9 系統(tǒng)在基因的定點(diǎn)修飾中展現(xiàn)出巨大的應(yīng)用潛能。脫靶效應(yīng)是目前 CRISPR/Cas9 技術(shù)應(yīng)用的一個(gè)難題,在基因編輯應(yīng)用中,可能會(huì)出現(xiàn)難以預(yù)測(cè)的后果。
      本制品是 spCas9 Nuclease 的一個(gè)突變體。Cas9 Nuclease 具有兩個(gè)切割活性中心,從而實(shí)現(xiàn)在 sgRNA 靶序列特定位點(diǎn)引入 DNA 雙鏈斷裂(DSB)。Cas9 (D10A,H840A) Nuclease 在 Cas9 Nuclease 基礎(chǔ)上突變兩個(gè)切割活性中心,使其只具有靶 DNA 結(jié)合活性,但無切割活性。

產(chǎn)品特點(diǎn):純蛋白體系,避免 CRISPR 基因敲除時(shí)引入質(zhì)?;虿《靖蓴_;

保存體系:10mM Tris-HCl,300mM NaCl,0.1mM EDTA,50% Glycerol, PH7.4,25℃。

保存溫度:-20℃保存,或-80℃長(zhǎng)期保存。

Cas9(D10A,H840A) Nuclease 產(chǎn)品包裝(A包裝):

產(chǎn)品組成體積
Cas9(D10A,H840A) Nuclease(0.1μg/μl)500 μL
10×Reaction Buffer1 ml

質(zhì)量保證:經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE 膠檢測(cè)僅可見清晰單一的目的條帶,純度達(dá) 95%;內(nèi)毒素含量< 0.1EU/μg;qPCR 方法檢測(cè)無大腸桿菌基因組殘留;無 RNase、核酸內(nèi)、外切酶污染。

體外切割體系(20μL):

dsDNA200 ng
sgRNA200 ng
Cas9 (D10A, H840A) Nuclease200ng
10×Reaction Buffer2 μl
RNase Free WaterTo 20 μl

37 ℃保溫 1 h、70℃保溫 10 min 
注:在反應(yīng)體系中可添加 RNase Inhibitor 至 1U/μl,防止RNase 污染。

相關(guān)產(chǎn)品:

HKE365NLS-Cas9 Nuclease
HKE366*Cas9(D10A)Nickase
HKE367**Cas9(H840A)Nickase
HKE369sgRNA In Vitro one-step Transcription Kit
HKE370sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit

* 為 Cas9(D10A) Nickase,能在與 sgRNA 靶序列互補(bǔ)的 DNA 鏈上產(chǎn)生切口,從而形成功能性的單鏈斷裂,可以減少意外的脫靶基因修飾。
** 為 Cas9(H840A) Nickase,能在 sgRNA 靶序列所在的DNA 鏈上產(chǎn)生切口,從而形成功能性的單鏈斷裂,可以減少意外的脫靶基因修飾。

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