產(chǎn)品名稱：NLS-Cas9 Nuclease
中文名稱：NLS-Cas9 核酸酶
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格：
| 編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 價格 |
| HKE365-01A | NLS-Cas9 Nuclease | 50μg/盒 | crispr基因編輯（核酸酶） | 1365 |
產(chǎn)品描述：CRISPR/Cas9是細菌和古細菌在長期演化過程中形成的一種適 應(yīng)性免疫防御系統(tǒng)。CRISPR/Cas9系統(tǒng)通過將入侵噬菌體和質(zhì)粒 DNA的片段整合到CRISPR序列中，并利用相應(yīng)的CRISPR RNAs （crRNAs）來指導(dǎo)Cas9蛋白對同源序列的降解，從而提供免疫性。 人工改造過的Cas9/sgRNA系統(tǒng)通過sgRNA（short guide RNA）引導(dǎo) Cas9蛋白識別并剪切帶有sgRNA靶點的雙鏈DNA，可用于基因敲除 和精確編輯DNA等操作。本試劑盒提供的Cas9核酸內(nèi)切酶通過在蛋 白兩端加了核定位信號（NLS），可使蛋白進入細胞核內(nèi)進行基因 組編輯。
產(chǎn)品特點：純蛋白體系，避免CRISPR基因敲除時引入質(zhì)粒或病毒干擾。
產(chǎn)品用途：
1，基于蛋白與sgRNA轉(zhuǎn)染的非病毒載體CRISPR基因敲除；
2，基于蛋白與sgRNA轉(zhuǎn)染的非病毒載體CRISPR基因敲入；
3，sgRNA 剪切靶點DNA 效率檢測，降低體內(nèi)篩選成本；
4，體外剪切靶 DNA 的特異位點。
應(yīng)用實例：圖例）Cas9 Nuclease做 DNA片段切割活性檢測。
帶有靶位點的DNA片段為6100 bp；
酶切后的片段為3900 bp和 2200 bp。
保存溫度：-20℃保存，或-80℃長期保存。
NLS-Cas9 Nuclease 產(chǎn)品包裝（A包裝）：
| 產(chǎn)品組成 | 體積 |
| NLS-Cas9 Nuclease（1μg/ μL） | 50 μL |
| 10×Reaction Buffer | 500 μL |
| *HKE365-02 系列為 5 μg/μL濃度，共 10μL。 | |
體外切割體系（20μL）：
| dsDNA | 200 ng |
| sgRNA | 200 ng |
| NLS-Cas9 Nuclease | 0.5-1 μg |
| 10×Reaction Buffer | 2 μL |
| RNase Free Water | 至 20 μL |
37 ℃保溫 1 h、70℃保溫 10 min
注：可在反應(yīng)體系中添加 20U 的 RNase Inhibitor，防止 dsDNA 不純導(dǎo)致 sgRNA 的降解。
相關(guān)產(chǎn)品：
| HKE366* | Cas9（D10A） Nickase |
| HKE367** | Cas9（H840A）Nickase |
| HKE368*** | Cas9(D10A,H840A) Nuclease |
| HKE369 | sgRNA In Vitro one-step Transcription Kit |
| HKE370 | sgRNA Screening and Genotype Confirmation Kit |
* 為 Cas9（D10A）Nickase，能在與 sgRNA 靶序列互補的 DNA 鏈上產(chǎn)生切口，從而形成功能性的單鏈斷裂，可以減 少意外的脫靶基因修飾。
** 為 Cas9（H840A）Nickase，能在與 sgRNA 靶序列非互 補的DNA 鏈上產(chǎn)生切口，從而形成功能性的單鏈斷裂，可以 減少意外的脫靶基因修飾。
*** 為 Cas9(D10A,H840A) Nuclease，具有靶DNA 結(jié)合活性， 但無切割活性，可用于陰性對照等用途。
