產(chǎn)品名稱:One-Step RT-PCR Kit
中文名稱:一步法 RT-PCR 試劑盒(一步法逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)試劑盒)
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:
編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 產(chǎn)品價格 |
HKE045-01A | One-Step RT-PCR Kit | 200次 | 一步法 RT-PCR 試劑盒 (一步法逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)試劑盒 | 英文全稱:One-step reverse transcription-polymerase chain reaction kit) | 1695 |
產(chǎn)品描述:One-Step RT-PCR Kit 一步法 RT-PCR 試劑盒是基于本公司Reverse Transcriptase 反轉(zhuǎn)錄酶(Cat.No: HKE123)和 HotStart Taq DNA 聚合酶(Cat.No: HKE017),對緩沖液體系進(jìn)行優(yōu)化使 反轉(zhuǎn)錄酶和聚合酶同時發(fā)揮最大功效,具有方便、快速、靈敏度高、重 復(fù)性好等特點(diǎn)。該試劑盒能以動物、植物和微生物的總 RNA 或 mRNA 為模板,cDNA 合成和 PCR 反應(yīng)在一個管中進(jìn)行,反轉(zhuǎn)錄結(jié)束后可直接進(jìn)行 PCR 循環(huán)而不用增加額外的步驟;同時可對低至 1fg 的總 RNA 進(jìn)行擴(kuò)增,有助于大量樣品的處理并減少污染機(jī)會。
產(chǎn)品特點(diǎn):
效率高,可反轉(zhuǎn)錄 GC 含量 ,二級結(jié)構(gòu)復(fù)雜的 RNA 模板。
獨(dú)特的緩沖體系使反轉(zhuǎn)錄酶和聚合酶同時發(fā)揮最大功效。
操作簡單,可最大限度的避免污染。
注意事項(xiàng):
1)本試劑盒 PCR 擴(kuò)增延伸時間為 1kb/min,客戶可根據(jù)具體片段長度進(jìn)行延伸時間的調(diào)整。
2)通常情況,28~30 個循環(huán)可達(dá)到最佳擴(kuò)增,對于低拷貝目的基因的檢測,可將循環(huán)數(shù)增加到 40 個。
3)如果同時操作多個樣品,建議先在冰上先配制預(yù)混液,然后再分裝到各個反應(yīng)管中,加入模板啟動反應(yīng)。
4)反應(yīng)出現(xiàn)目標(biāo)條帶拖帶,系模板濃度過高或特異引物濃度不適等原因所致,可對模板及引物濃度等進(jìn)行調(diào)整;反應(yīng)出現(xiàn)雜帶,可對退火溫度進(jìn)行調(diào)整,或重新設(shè)計(jì)特異性高的引物。
5)本試劑盒只需使用特異性反轉(zhuǎn)錄引物,無需使用 Random Primer 和 Oligo dT Primer 等進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
6)為了保證反應(yīng)的正常進(jìn)行,需使用高質(zhì)量的 RNA 模板。
保存溫度:-20℃。
產(chǎn)品包裝(A包裝):
操作方法:
1)將 RNA 模板、引物 、 2×One-Step RT-PCRSuperMix,RT Enzyme Mix 和 RNase Free Water 溶解并置于冰上備用。
2) 配制以下反應(yīng)體系:
3)輕輕混勻后短暫離心,使管壁上的溶液收集到管底。
4)設(shè)置反應(yīng)程序: