產(chǎn)品名稱:第一鏈cDNA合成超級(jí)混合液
英文名稱:1st Strand cDNA Synthesis SuperMix
產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格:
編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 產(chǎn)品價(jià)格 |
HKE043-01B | 第一鏈cDNA合成超級(jí)預(yù)混液 | 100次(20μl體系) | 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix | 1075 |
產(chǎn)品描述:第一鏈 cDNA 合成預(yù)混液是以 mRNA 或者總 RNA 為模板,高效合成第一鏈cDNA。本產(chǎn)品含有反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)所 的全部 試 劑 ( Reverse Transcriptase ,RNase Inhibitor ,Oligo(dT)18 , Random N6,dNTPs),濃度為 2×。反應(yīng)時(shí)只需要加入 RNA 模板 和水即可,操作簡單,減少操作過程中的污染。合成的第一鏈 cDNA 可直接用于 PCR 或熒光定量 PCR 的模板,第二鏈 cDNA 的合成或線性 RNA 擴(kuò)增,也可用于需要用帶有放射性或非放射性核苷酸標(biāo)記第一鏈 cDNA 的實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品特點(diǎn):
本制品中使用的 Reverse Transcriptase 無 RNase H 活性,可避免第一鏈 cDNA 合成過程中,RNA/DNA 雜交模板鏈中 RNA降解,保證了 cDNA 合成質(zhì)量。
本制品中 Random N6 和 Oligo(dT)18 引物比例經(jīng)過優(yōu)化,可均勻合成樣品中的 cDNA。
操作簡單,只需要加入 RNA 模板和水即可完成反應(yīng)體系配制,降低了操作過程中的污染機(jī)會(huì)。
保存溫度:-20℃。
產(chǎn)品包裝(A包裝):
注意事項(xiàng):
1)用 DEPC 處理實(shí)驗(yàn)用到的所有實(shí)驗(yàn)器材,或購買已經(jīng)證明無核酸酶的實(shí)驗(yàn)用具,實(shí)驗(yàn)過程戴手套并經(jīng)常更換手套,避免 RNA 酶的污染。
2)確保所用試劑中無 RNA 酶污染。
3)試劑盒要嚴(yán)格密封保存。在反轉(zhuǎn)錄過程中,所有管子確??蹏?yán)。
4)純化過的 RNA 必須保證不含有鹽,金屬離子,乙醇和苯酚,以上成分會(huì)干擾第一鏈 cDNA 合成反應(yīng)??刹捎靡掖汲恋?RNA 的方法去除掉痕量污染物。
5)為保證反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)有效進(jìn)行,需使用 質(zhì)量的 RNA 模板。
6)有實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示,本反轉(zhuǎn)錄酶可在 15 分鐘內(nèi)完成 1kb 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
操作方法:
常用PCR 循環(huán):