產(chǎn)品名稱:第一鏈cDNA合成試劑盒(去除gDNA)
英文名稱:1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA Purge)
產(chǎn)品編號與包裝規(guī)格:
編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 產(chǎn)品介紹 | 產(chǎn)品價格 |
HKE042-01B | 第一鏈cDNA合成試劑盒(去除gDNA) | 100次 | 1st Strand cDNA Synthesis Kit(gDNA Purge) | 1169 |
產(chǎn)品描述:第一鏈 cDNA 合成試劑盒(去基因組)是以 mRNA 或者總RNA 為 模 板 , 高 效 合 成 第 一 鏈 cDNA 。本試劑盒使 用Reverse Transcriptase 反轉(zhuǎn)錄酶(Cat.No: HKE123),它的 RNase H 的活性與 AMV 反轉(zhuǎn)錄酶相比較低。該反轉(zhuǎn)錄酶可耐受 42~50°C 溫 度 。 試 劑 盒 中 含 有 重 組 RNA 酶抑制 ( Cat.No:HKE125),可耐受 55°C 高溫,有效 止 RNA 解。本制品含有去基因組成分 gDNA Purge,以 RNA 為模板進(jìn)行 cDNA 第一鏈合成時,可以同步去除基因組 DNA 污染,反應(yīng)結(jié)束后,70℃加熱 5 分鐘,就可以失活反轉(zhuǎn)錄酶、RNA 酶抑制劑、gDNA Purge。
產(chǎn)品特點:
環(huán)凱生物反轉(zhuǎn)錄酶無 RNase H 活性,可避免第一鏈 cDNA 合成過程中,RNA/DNA 雜交模板鏈中 RNA 降解,保證 cDNA 合成的質(zhì)量。
試劑盒中含去基因組成分,反轉(zhuǎn)錄時可同步去除基因組 DNA污染。
保存溫度:-20℃。
產(chǎn)品包裝:
注意事項:
1)用 DEPC 處理實驗用到的所有實驗器材,或購買已經(jīng)證明無核酸酶的實 用具,實 過程戴手套并經(jīng)常更換手套,避免 RNA 酶的污染。
2)確保所用試劑中無 RNA 酶污染。
3)試劑盒要嚴(yán)格密封保存。在反轉(zhuǎn)錄過程中,所有管子確??蹏?yán)。
4)純化過的 RNA 必須保證不含有鹽,金屬離子,乙醇和苯酚,以上成分會干擾第一鏈 cDNA 合成反應(yīng)。可采用乙醇沉淀 RNA 的方法去除掉痕量污染物。
5)為保證反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)有效進(jìn)行,需使用高質(zhì)量的 RNA 模板。
6)有實驗結(jié)果提示,本反轉(zhuǎn)錄酶可在 15 分鐘內(nèi)完成 1kb 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)。
操作方法:
常用PCR 循環(huán):