注:
本產(chǎn)品現(xiàn)已停售,可用公司研發(fā)生產(chǎn)的 HKI003 EasyID蠟樣芽孢桿菌生化鑒定試劑盒 10test 進(jìn)行替代,產(chǎn)品鏈接地址:http://www.qsenn.com.cn/show/24919.html
071800 蠟樣芽胞桿菌胞桿菌生生化鑒定盒(8種×10次)
一)整套試劑及用品
鑒定生化反應(yīng)的8種試劑(表1)、8瓶0.85%無(wú)菌生理鹽水、1瓶1McFarland的濁度管、8支一次性吸管。
二)生化管的使用方法
開(kāi)啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無(wú)菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開(kāi)鋁蓋,撕開(kāi)鋁蓋,打開(kāi)西林瓶
膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
三)蠟樣芽胞桿菌生化鑒定盒的詳細(xì)使用方法
蠟樣芽胞桿菌為革蘭氏陽(yáng)性大桿菌,寬度在1μm或1μm以上,芽胞呈卵圓形,不突出菌體,多位于菌體中央或稍偏于一端。
能產(chǎn)生卵磷脂酶和酪蛋白酶,不發(fā)酵甘露醇和木糖。在MYP平板上為粉紅色菌落,周圍有粉紅色的暈;在酪蛋白瓊脂上菌落周
圍有透明圈。本菌在肉湯中生長(zhǎng)渾濁,常微有菌膜或壁環(huán),振蕩易乳化,在普通瓊脂平板上生成的菌落不透明、表面粗糙、似
毛玻璃狀或融臘狀、邊緣不齊。
將待試品用10倍梯度稀釋法稀釋至合適的濃度,MYP平板分離,37℃培養(yǎng)12~20小時(shí),將疑似蠟樣芽胞桿菌的新鮮菌苔
置于無(wú)菌生理鹽水中,以1 McFarland的濁度管為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照,制備成1McFarland (約3.0×108cfu/mL )菌懸液,往每種微量生化
管內(nèi)滴加2滴(約0.06mL)菌懸液。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表
注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),
結(jié)果觀察見(jiàn)表1。
注意:如有特殊的接種方式或培養(yǎng)時(shí)間,請(qǐng)?jiān)斠?jiàn)每種生化鑒定管附帶的使用說(shuō)明。
四)蠟樣芽胞桿菌的生化分型和鑒定特征 (只供參考)
1. 蠟樣芽胞桿菌可根據(jù)對(duì)檸檬酸鹽利用、硝酸鹽還原、淀粉水解、V-P反應(yīng)、明膠液化性狀的試驗(yàn),將該菌分成不同的型別。
本菌在生化性狀上與蘇云金芽胞桿菌極為相似,但后者可藉細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶體加以鑒別。其方法如下:取經(jīng)30±1℃培養(yǎng)24±2h并于室溫放置3~4天的營(yíng)養(yǎng)瓊脂(022022),適用于芽胞桿菌蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶體的形成)培養(yǎng)物少許于載玻片上,滴加蒸餾水混勻并涂成菌膜。經(jīng)自然干燥,微火固定后,加甲醇作用30秒后傾掉,再通過(guò)火焰干燥,于載玻片上滴滿0.5%堿性復(fù)紅液,放火焰上加熱微見(jiàn)蒸氣(勿使染液沸騰)后持續(xù)1.5分鐘,移去火焰,更換染色液再次加溫染色30秒,傾去染液用自來(lái)水徹底清洗、晾干后油鏡鏡檢。觀察有無(wú)游離芽胞和染成深紅色的菱形、正方形或其它性狀的蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶體(如發(fā)現(xiàn)游離芽胞形成的不豐富,應(yīng)將培養(yǎng)物置室溫2~3天再行檢查),如有即為蘇云金芽胞桿菌,蠟樣芽胞桿菌檢查為陰性。